1. 🧼 实验前准备：首先，用75%的酒精浸泡消毒所有手术器械，如剪刀和镊子。

🐭 麻醉小鼠：使用10%的水合氯醛，通过腹腔注射来麻醉小鼠。麻醉程度需评估，深度麻醉时无疼痛感，中度麻醉时有痛感，一般达到中度麻醉即可。麻醉后的小鼠眼睛会睁开，可以涂红霉素软膏保湿，并遮挡灯光。

🔧 固定头部：待小鼠进入麻醉状态后，用两个耳杆和一个门齿夹来固定其头部，使其水平固定在脑立体定位仪上。

✂️ 准备头皮：用剪刀剪掉小鼠头部毛发，并用酒精消毒头皮，然后剪开头皮充分暴露颅骨。

🧴 消毒颅骨：用蘸有碘伏的棉签消毒颅骨，再用蘸有双氧水的棉签去除脑膜，使前后囟清晰暴露。

🧭 调整位置：以前囟为参考点，调整耳杆位置使y轴与矢状缝重合，调整前后高度，当前囟坐标为（0，0，0）时，若后囟的坐标为（0，4.2，0），则认为前后水平。

📏 调整左右高度：使颅骨左右距中线2 mm的点，其高度差小于0.03 mm，则认为左右水平。

🖊️ 标记前囟：待小鼠头部前后、左右调整水平后，用中性笔在前囟做好标记，然后以前囟为参考点，根据目标脑区坐标确定相应注射位点。

🔩 钻孔：用电钻在脑区相应的颅骨上钻孔，操作过程中减少出血，用棉球将血尽量吸干。

💉 准备注射：用蘸有生理盐水的棉球擦拭针尖，推出30-50 nl病毒，确保针尖处无气泡。

💥 注射病毒：选择合适的病毒注射体积及注射速度进行注射。

🕰️ 停针等待：注射完后停针10分钟，减少虹吸现象，随后缓慢拔出注射器。

🧵 缝合头皮：最后缝合头皮，缝合前在颅骨表面涂红霉素软膏防止感染，再次使用碘伏消毒。

🔥 苏醒小鼠：将小鼠置于加热垫上，待其完全苏醒后，放回饲养笼中，给予充足的水和食物。

文章出自：动物验外实包   想了解更多请关注：http://www.dj-cro.com/